LITHUANIAN UNIVERSITY OF HEALTH SCIENCES LUHS LIBRARY REPOSITORY

Kiaulių bei šernų reprodukcijos ir kvėpavimo sindromo viruso padermių savybės ir molekulinis charakterizavimas

Show simple item record

dc.contributor.author Deltuvytienė, Jurgita
dc.date.accessioned 2018-11-06T13:15:32Z
dc.date.available 2018-11-06T13:15:32Z
dc.date.issued 2015
dc.identifier.uri http://repository.lsmuni.lt/handle/1/60352
dc.description.abstract Darbo tikslas: ištirti šernų KRKSV paplitimą ir įvertinti ląstelių kultūrose izoliuotų padermių savybes in vitro ir in vivo. Darbo uždaviniai: 1. Nustatyti KRKSV paplitimą šernų populiacijoje ir palyginti su epidemiologi- ne situacija Lietuvos kiaulininkystės ūkiuose atliekant serologinius tyrimus. 2. Nustatyti tinkamiausius šernų KRKSV diagnostikai oligonukleotidinius pradmenis ir zondus, plačiai naudojamus ir pritaikytus kiaulių KRKSV diagnostikai TaqMan AT-PGR ir AT-nPGR metodais. 3. Nustatyti šernų KRKSV 3-ojo ir 4-ojo subtipų padermių replikacines galimybes ir poveikį pirminei alveolinių makrofagų ir persėjamajai MARK-145 ląstelių kultūrai. 4. Atlikti šernų ir kiaulių PAM ir MARK-145 ląstelių kultūrų izoliatų ORF5 srities nukleotidų ir aminorūgščių sekų filogenetinę analizę. 5. Šernų 3-ojo ir 4-ojo subtipų KRKSV izoliatų patogeniškumą įvertinti in vivo. Pirmą kartą serologiniais tyrimais buvo nustatyta, kad Lietuvos šernų populiacijoje KRKSV infekcija labiau paplitusi nei kiaulininkystės ūkiuose. Šernų KRKSV tyrimai AT-nPGR, TaqMan PGR metodais, naudojant ORF1, ORF5, ORF6 ir ORF7 koduojančių sričių oligonukleotidinius pradmenis, parodė, kad Lietuvoje šernai yra aktyvūs europietiškojo genotipo užkrato pernešėjai. Atlikti tyrimai in vitro įrodė, kad šernų KRKSV padermės gali būti sėkmingai izoliuojamos ne tik pirminėje alveolinių makrofagų kultūroje, bet ir persėjamojoje MARK-145 ląstelių linijoje. Šernų KRKSV padermių ORF5 srities nukleotidų sekos buvo susekvenuotos ir paskelbtos GenBank duomenų bazėje (Nr. KC714037-KC714042 ). Tyrimo metu buvo nustatytos 3-ojo ir 4-ojo subtipų europietiškojo genotipo KRKSV padermės, kurios paprastai neaptinkamos Lietuvos kiaulių populiacijoje. Pirmą kartą Lietuvoje eksperimentiniais tyrimais nustatyta, kad alveoliniuose makrofaguose izoliuotos 3-ojo ir 4-ojo subtipų šernų KRKSV padermės yra patogeniškos paršeliams. Atlikti tyrimai pateikia įrodymus, kad šernai yra KRKSV gamtinis rezervuaras Rytų Europoje.
dc.description.abstract The aim of the study: to investigate PRRSV prevalence in wild boars and evaluate the properties of isolated strains in cell cultures in vitro and in vivo. The objectives of the study: 1. To establish serologically the prevalence of PRRSV in the wild boar population and to compare it with the epidemiological situation on pigbreeding farms in Lithuania. 2. By means of molecular methods to directly assess PRRSV prevalence in blood serum and lung samples of wild boars, to establish the oligonucleotid primers and probes most suitable to PRRSV diagnostics that are widely used and adapted to diagnostics of PRRSV among pigs by using the TaqMan RT-PCR and RT-nPCR methods. 3. To establish replicative possibilities of PRRSV 3 and 4 subtypes and their impact on the primary porcine alveolar macrophages and MARC-145 cell culture. 4. To carry out a phylogenetic analysis of nucleotide and amino acid sequences of the isolates of PAM and MARC-145 cell cultures of ORF5 region of wild boars and pigs. 5. To evaluate pathogenicity of PRRSV isolates of the 3rd and 4th subtypes of wild boars in vivo.
dc.language.iso lit
dc.subject Šernai
dc.subject KRKSV
dc.subject TaqMan AT-PGR
dc.subject AT-nPGR
dc.subject Biologinės savybės
dc.subject Wild boars
dc.subject PRRSV
dc.subject TaqMan PCR
dc.subject RT-nPCR
dc.subject Isolated strains
dc.title Kiaulių bei šernų reprodukcijos ir kvėpavimo sindromo viruso padermių savybės ir molekulinis charakterizavimas
dc.title.alternative Porcine and wild boars reproductive and respiratory syndrome virus properties and molecular characterization of the isolated strains
dc.type Daktaro disertacija


Files in this item

This item appears in the following Collection(s)

Show simple item record

Search repository


Browse

My Account